Co-expression P450 BM3和葡萄糖脱氢酶的重组大肠杆菌NADPH-dependent靛蓝生产系统及其应用。

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陆Y,梅L

Co-expression P450 BM3和葡萄糖脱氢酶的重组大肠杆菌NADPH-dependent靛蓝生产系统及其应用。

J印第安纳州生物科技Microbiol》。2007年3月,34 (3):247 - 53。Epub 2006年12月14日。

PubMed ID

17171348 (在PubMed

]

文摘

P450 BM3突变可以催化吲哚吲哚酚、吲哚酚二聚成靛蓝。但反应催化P450 BM3需要NADPH作为辅酶再生在这个系统是很重要的。正如我们所知,当葡萄糖脱氢酶氧化葡萄糖在葡萄糖酸内酯,NADH或NADPH可以形成,从而导致P450 BM3 NADPH在反应中催化再生。在这篇文章中,重组大肠杆菌BL21 (pET28a (+) P450 BM3-gdh0310)建于co-express P450 BM3基因和葡萄糖脱氢酶(GDH)基因。提高表达水平P450 BM3和GDH的大肠杆菌,避免复杂和低效重折叠操作在净化过程中,表达条件进行了优化。在优化条件下,最大P450 BM3和GDH活动达到8173.13和0.045 U /毫克蛋白,分别。然后进行生物转化的吲哚靛蓝通过添加吲哚和葡萄糖后文化在优化条件下,获得了更好的表达水平和2.9 mM (760.6 mg / L)靛蓝成立,最初吲哚5毫米的浓度。

DrugBank数据引用了这篇文章

药物靶点

药物	目标	类	生物	药理作用	行动
NADH	国民幸福指数/ 6 pgl内质的双功能蛋白	蛋白质	人类	未知的	不可用	细节