人1 α，25-二羟基维生素D-3 24-羟化酶基因启动子的克隆及两种维生素d反应元件的鉴定。
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陈ks, DeLuca HF
人1 α，25-二羟基维生素D-3 24-羟化酶基因启动子的克隆及两种维生素d反应元件的鉴定。
生物化学学报，1997,25;1263(1):1-9。
- PubMed ID
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7632726 (PubMed视图］
- 摘要
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从人类第20号染色体文库中分离到1 α，25-二羟基维生素D-3 (1,25-(OH)2D3) 24-羟化酶的基因组DNA克隆。它的长度为2.42 kb，包含前两个外显子，第一个和第二个内含子的一部分，以及一个1.26 kb的5'侧区。推测的转录顺式元件显示在整个5'侧区，包括TATA盒，CAAT盒，GC盒，维生素d响应元件(VDRE)， AP1和AP2位点。在CAT报告基因表达试验中，24-羟化酶启动子及其1.2 kb 5'侧链序列可诱导1,25-(OH) 2d3诱导的转激活活性。这些假定的DREs的凝胶迁移率变化分析已经确定了两种不同的元素可以与猪肠核提取物(PINE)形成特定的配合物。利用vdr特异性单克隆抗体VXIE10B6的超移实验验证了vdr - pine复合物的特异性。近端元件VDREp(-172/-143)由三个反义方向的直接重复半位点GAGTCAgcgAGGTGAgcgAGGGCG组成。远端元件VDREd(-293/-273)由两个直接重复半位点组成，GCGTTCaccGGGTGT，也是反义取向。这两种vdre都能以1,25-(OH) 2d3依赖的方式，使用外源单纯疱疹病毒胸苷激酶(TK)启动子来指导报告基因的表达。对这些VDREs的进一步表征表明，这两种VDREs都是1,25-(OH)2D3诱导24-羟化酶表达的最佳条件。