使用同源性探索的DNA聚合酶连锁反应:隔离部分互补脱氧核糖核酸或基因克隆编码iron-sulfur蛋白琥珀酸脱氢酶的几个物种。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
古尔德SJ, Subramani年代,Scheffler IE
使用同源性探索的DNA聚合酶连锁反应:隔离部分互补脱氧核糖核酸或基因克隆编码iron-sulfur蛋白琥珀酸脱氢酶的几个物种。
《美国国家科学院刊S a . 1989年3月,86 (6):1934 - 8。
- PubMed ID
-
2494655 (在PubMed]
- 文摘
-
DNA聚合酶链反应了体外扩增特定DNA序列,它被用于各种各样的目的在几个领域。我们已经开发了一个应用程序的有用的聚合酶链反应隔离部分互补脱氧核糖核酸或基因保守基因的克隆。我们使用这种技术来克隆该基因编码的铁蛋白亚基(kDa 27日)琥珀酸脱氢酶(EC 1.3.5.1)从几个物种,包括人类,老鼠,果蝇,拟南芥,粟酒裂殖酵母和酿酒酵母。混合寡核苷酸引物对应两个守恒的地区使用的蛋白质与基因组和互补dna模板的反应。包含所有可能的核苷酸引物组合编码对应的肽序列。这些寡核苷酸混合物含有262144(2(18)和8192(2(13)独特的序列,分别。使用聚合酶链反应的同源性探索允许使用更复杂的混合物的寡核苷酸探针比与滤膜杂交筛选技术是可行的。此外,聚合酶链反应提供了直接合成DNA的优势产品,在某些情况下无需构造互补脱氧核糖核酸或基因库。这个应用程序的聚合酶链反应不仅应该是有用的保守基因的识别各种孤立的物种还未知的基因家族的成员。