反应性的人类thioltransferase glutaredoxin c7,这件,C78S, C82S突变体和核磁共振的解决方案结构glutathionyl混合二硫中间反映催化特异性。
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杨Y, Jao Sc Nanduri年代,斯达克DW, Mieyal JJ,秦J
反应性的人类thioltransferase glutaredoxin c7,这件,C78S, C82S突变体和核磁共振的解决方案结构glutathionyl混合二硫中间反映催化特异性。
生物化学。1998年12月8日,37 (49):17145 - 56。
- PubMed ID
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9860827 (在PubMed]
- 文摘
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人类thioltransferase (TTase)是一个12 kDa thiol-disulfide氧化还原酶似乎发挥重要作用在维持细胞的氧化还原环境。TTase充当一个强有力的和特定的还原剂protein-S-S-glutathione混合二硫化(protein-SSG)可能形成在氧化应激或氧化还原信号转导途径的中间体。因此,thioltransferase本身涉及的催化循环共价glutathionyl酶二硫中间(TTase-C22-SSG)。了解谷胱甘肽TTase特异性的分子基础的一部分,我们设计了一个四半胱氨酸Ser突变的人类TTase (c7,这件,C78S C82S)只保留活性部位的半胱氨酸残基(C22),我们解决了它的高分辨率核磁共振二硫化混合解决方案结构中间与谷胱甘肽(QM-TTase-SSG)。这个突变体不能形成一个C22-S-S-C25分子内二硫显示相同的催化效率(Vmax /公里)和特异性为野生型TTase二硫化glutathionyl混合基质,表明Cys-25-SH一部分不需要催化或glutathionyl特异性。人类thioltransferase的结构特点是由thioredoxin-like倍四股中央β褶板左右两侧各有阿尔法螺旋。TTase-SSG disulfide-adducted谷胱甘肽的复杂有一个扩展的构象和本地化附近的裂缝从helices-alpha2蛋白质表面的残留物,alpha3,活性部位循环,循环连接helix-alpha3 strand-beta3。大量的范德瓦耳斯和蛋白质之间的静电相互作用,谷胱甘肽一半被确定为导致复杂的协商和底物特异性的稳定。比较的人类与其他thiol-disulfide thioltransferase氧化还原酶结构和功能差异。