高层次的表达大肠杆菌NADPH-sulfite还原酶:要求克隆cysG质粒克服限制siroheme代数余子式。
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吴司法院,西格尔LM, Kredich海里
高层次的表达大肠杆菌NADPH-sulfite还原酶:要求克隆cysG质粒克服限制siroheme代数余子式。
J Bacteriol。1991年1月,173(1):325 - 33所示。
- PubMed ID
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1987123 (在PubMed]
- 文摘
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大肠杆菌的黄素蛋白和hemoprotein组件B NADPH-sulfite还原酶是由cysJ编码和cysI,分别。包含这两个基因过表达质粒黄素蛋白催化活性和apohemoprotein 13 - 35-fold,但NADPH-sulfite还原酶全酶活动只是增加了三倍。全酶活动的最大超表达是通过包含在这样的鼠伤寒沙门氏菌的质粒cysG,编码一个uroporphyrinogen三世甲基转移酶的合成所需siroheme, hemoprotein的代数余子式。因此,辅助因子缺乏,在这种情况下siroheme,可以限制克隆酶的过度。全酶催化地活跃占总可溶性蛋白的10%包含克隆cysJ主机,cysI, cysG。5.3 kb DNA片段包含美国沙门氏菌感染cysG测序,以及相对应的开放阅读框cysG被subcloning识别,通过识别plasmid-encoded肽在大型细胞。与大肠杆菌的序列报道cysG地区(j . a科尔,未发表的数据;基因库序列ECONIRBC)表明一个基因克隆nirB-nirC-cysG令美国培养的片段。此外,两艘身份不明的开放阅读框架cysG下游立即被发现。其中一个包含11直接重复33个核苷酸,它对应于氨基酸序列Asp-Asp-Val-Thr-Pro-Pro-Asp-Asp-Ser-Gly-Asp共识。