高活性蛋白从一个极端嗜热生物修复酶:L-isoaspartyl的甲基转移酶从Thermotoga maritima。
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市川JK,克拉克
高活性蛋白从一个极端嗜热生物修复酶:L-isoaspartyl的甲基转移酶从Thermotoga maritima。
拱生物化学Biophys。1998年10月15日,358(2):222 - 31所示。
- PubMed ID
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9784234 (在PubMed]
- 文摘
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我们表明,开放阅读框Thermotoga maritima基因组初步确认为pcm基因(r . v . Swanson et al ., j . Bacteriol。178年,484 - 489,1996)确实编码一种蛋白质L-isoaspartate (D-aspartate) O-methyltransferase (EC 2.1.1.77),这种蛋白质修复酶显示一些新颖的特点。我们表达了317氨基酸pcm基因产物的嗜热细菌大肠杆菌作为一种融合蛋白的氨基端20残渣hexa-histidine-containing序列。这种蛋白质包含大约100 c端域的残留而不是以前见过这种酶的各种原核或真核物种并没有序列相似性基因库中的任何其他条目的数据库。酶功能所需的c端地区似乎没有活动中发现两个重组结构缺乏这一领域。沉降平衡分析表明这种酶在溶液中单体的。肽和蛋白质的Km值测量基板被发现之间的中间的高亲和性的人类酶和lower-affinity小麦、线虫和大肠杆菌的酶。酶是非常热稳定,没有活动在100 degreesC 60分钟后的损失。观察酶活性在温度高达93 degreesC与最优活动164 nmol /分钟/ 85 degreesC毫克的蛋白质。这次活动大约是18倍高于37 degreesC嗜中温同系物的最大活动。这些数据表明,启动修复的Thermotoga酶具有独特的功能受损蛋白质包含L-isoaspartyl残留在升高的温度下。