人肝脏细胞色素P-450硝苯地平氧化酶相关mRNA种类的表征及其催化活性的调控。
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博克RW，武藤T，伯恩PH，斯利瓦斯塔瓦PK，劳埃德RS, Guengerich FP
人肝脏细胞色素P-450硝苯地平氧化酶相关mRNA种类的表征及其催化活性的调控。
生物化学杂志，1989年1月15日;264(2):910-9。
- PubMed ID
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2463251 (在PubMed］
- 摘要
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P-450NF是人类肝脏中参与钙通道阻滞剂硝苯地平代谢的主要酶。通过筛选噬菌体lambda gt11表达文库，分离到一个插入长度为2.8千碱基(kb)、命名为NF 10的cDNA克隆。对该克隆进行了测序，发现其重叠部分与此前从同一表达库NF 25中分离出的另外两个cDNA克隆序列高度相似(Beaune, P. H.， Umbenhauer, D. R.， Bork, R. W.， Lloyd, R. S.和Guengerich, F. P.(1986))。学会科学。美国宪法83,8064-8068)和HLp(莫洛瓦，D. T.，舒茨，e.g.，莱顿，s.a，沃特金斯，P. B.，克莱默斯，P.，门德兹-皮康，G.，帕克，G. A.和古泽利安，P. S. (1986)学会科学。美国法典83,5311 -5315)。然而，克隆NF 10相对于NF 25或HLp分别有额外的814或813个3'-非编码序列的碱基，这个额外的序列包含第二个一致聚腺苷化信号。合成了特异性寡核苷酸来在mRNA水平上区分这三个克隆。每个克隆蛋白编码区特异性的寡核苷酸与2.2和3.0 kb大小的mrna以大约10:1的比例杂交。 The major species of hybridizable mRNA was specific to clone NF 25, and levels of this mRNA could be correlated with levels of immunochemically detectable P-450NF and nifedipine oxidase activity in individual human liver samples. In addition, an oligonucleotide specific to the 3'-noncoding region of clone NF 10 hybridized only with the 3.0-kb mRNA. We conclude that alternative use of the second polyadenylation signal present in clone NF 10 results in production of the 3.0-kb mRNA species and that a pretranslational control mechanism is primarily involved in the regulation of nifedipine oxidase activity.