研究恶性疟原虫adenylosuccinate合成酶的活性位点突变体:洞察酶催化和激活。
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Mehrotra年代,Mylarappa BN, Iyengar P,巴拉罗姆H
研究恶性疟原虫adenylosuccinate合成酶的活性位点突变体:洞察酶催化和激活。
Biochim Biophys学报。2010年10月,1804 (10):1996 - 2002。doi: 10.1016 / j.bbapap.2010.07.015。Epub 2010 8月1。
- PubMed ID
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20654742 (在PubMed]
- 文摘
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可逆反应利用妖精Adenylosuccinate合成酶催化三磷酸鸟苷和天冬氨酸的毫克(2)+形成Adenylosuccinate, GDP和无机磷酸盐。比较类似的恶性疟原虫的配体复合物,鼠标和大肠杆菌AdSS揭示H-bonding交互涉及nonconserved催化循环残留物(Asn429, Lys62和Thr307)寄生虫特有的酶。定点诱变被用来检查这些交互作用的催化和结构组织的恶性疟原虫adenylosuccinate合成酶(PfAdSS)。突变Asn429 Val, Lys62亮氨酸和Thr307 Val导致增加K IMP (m)值,分别为三磷酸鸟苷和天冬氨酸以及5折的K (cat)值下降N429V突变表明这些残留在配体结合的角色和/或催化。我们已经表明,糖酵解中间早些时候,果糖1 6酮糖,这是一种抑制剂的哺乳动物股美国存托凭证是一种寄生虫酶的激活剂。酶动力学和分子对接表明激活机制在F16BP似乎绑定Asp循环和诱导构造,促进了天冬氨酸酶活性部位。像在其他层次,守恒的精氨酸残基(Arg155)是参与二聚体串扰和与IMP的活性部位PfAdSS对称相关的子单元。我们还精氨酸突变体的生化鉴定报告(R155L, R155K和R155A)这表明与大肠杆菌股美国存托凭证,Arg155 PfAdSS影响配体结合和催化。