人肺泡巨噬细胞释放的丝氨酸酯酶与肝微粒体羧酸酯酶密切相关。
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Munger JS, Shi GP, Mark EA, Chin DT, Gerard C, Chapman HA
人肺泡巨噬细胞释放的丝氨酸酯酶与肝微粒体羧酸酯酶密切相关。
生物化学杂志，1991 10月5日;266(28):18832-8。
- PubMed ID
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1918003 (在PubMed］
- 摘要
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我们在人支气管肺泡灌洗液中鉴定了一种60-kDa的氟磷酸二异丙基(DFP)反应蛋白，其产量为50-100 pmol/灌洗液。该蛋白与无细胞灌洗液沉积有关，主要由表面活性剂组成。[3H]DFP标记被加热到56℃、2mm苯甲基磺酰氟和1mm双(4-硝基苯)-磷酸盐抑制。同样的60-kDa [3H] dfp反应蛋白存在于肺泡巨噬细胞条件培养液的不溶部分和肺泡巨噬细胞的全膜制剂中。[3H] dfp标记蛋白通过大小排除(Sephacryl S-200)和离子交换(Mono-Q)色谱法从灌洗液沉积物中纯化约30倍。溴化氰处理部分纯化的蛋白产生一个14 kDa的主标记肽，其nh2端序列与兔肝1型微粒体羧酸酯酶的一个区域90%相同。以戊酸对硝基苯酯为底物，与[3H] dfp标记酶共化，检测未标记起始材料中的酯酶活性。简并寡核苷酸引物基于部分氨基酸序列和已知肝脏羧酸酯酶序列的高度保守区域设计。利用这些引物和反向转录的人肺泡巨噬细胞mRNA进行聚合酶链反应，得到354个碱基对的产物，然后用于筛选人肺泡巨噬细胞cDNA文库。一个完整的酯酶序列是从两个不完整的、重叠的无性系中获得的，几乎与人类肝脏羧酸酯酶的部分序列完全相同。 Northern blot analysis demonstrated a single approximately 1.7-kilobase transcript in human monocytes and alveolar macrophages, with much higher levels in the latter. These data indicate that human alveolar macrophages both contain and release a serine esterase that is apparently identical to liver microsomal carboxylesterase. Its enzymatic profile suggests it is a major component of alveolar macrophage-nonspecific esterase activity. We hypothesize that it acts as a detoxication enzyme in the lung.