快照的胱氨酸裂合酶在催化c - d。研究方案和结晶状态。
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Kaiser JT,布鲁诺年代,克劳森T, Huber R, Schiaretti F,凯斯勒Mozzarelli A, D
快照的胱氨酸裂合酶在催化c - d。研究方案和结晶状态。
生物化学杂志。2003年1月3;278 (1):357 - 65。Epub 2002年10月16日。
- PubMed ID
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12386155 (在PubMed]
- 文摘
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集胞藻属的胱氨酸裂合酶(c - d)是一个pyridoxal-5 NifS-like -phosphate-dependent酶家族的远亲的蛋白质。氨基改性的晶体结构变体最近被确定。的反应,这种酶变异研究光谱方法在解决方案和结晶状态跟踪反应的历程并确定分子水平上的催化机理。与首选使用stopped-flow技术,反应底物胱氨酸发现遵循两相的动力学形成吸收物种在338和470海里,归因于外部醛亚胺和alpha-aminoacrylate;半胱氨酸的反应也表现出两相的行为只有外部醛亚胺积累。相同的反应中间体形成晶体被极化吸收微量分光光度测定法,从而表明c - d是晶态催化地主管。催化地不活跃的突变体的三维结构c - d (K223A)胱氨酸的存在显示外部醛亚胺物种的形成,另两个构象的衬底被观察到。合并后的结果允许一个催化机理提出涉及胱氨酸和活性位点残基之间的相互作用参数- 360,arg - 369和trp - 251 *;这些残留物在beta-elimination调整反应,形成稳定的疏水口袋enolimine互变异构体aminoacrylate和半胱氨酸过硫化物的产品。