在ecotin妥协和住宿,二聚的大分子的丝氨酸蛋白酶抑制剂。
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吉尔默SA,竹内T,杨平方,Fletterick RJ Craik CS
在ecotin妥协和住宿,二聚的大分子的丝氨酸蛋白酶抑制剂。
J杂志。2000年6月16日,299 (4):993 - 1003。
- PubMed ID
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10843853 (在PubMed]
- 文摘
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Ecotin是二聚的丝氨酸蛋白酶抑制剂的大肠杆菌蛋白酶结合,形成hetero-tetramer与三个不同的接口:一个ecotin-ecotin二聚体界面,更大的主ecotin-protease接口和一个较小的二次ecotin-protease接口。这些接口绑定和抑制的贡献是不平等的。调查每个接口的贡献和适应性,我们解决了两个突变ecotin-trypsin复合物的结构和比较它们的结构之前确定野生型ecotin-trypsin复杂。野生型ecotin胰蛋白酶的亲和1纳米,而优化的突变,ecotin Y69F, D70P,发现使用噬菌体展示技术,抑制大鼠胰蛋白酶K(我)值为0.08 nM。Ecotin 67 - 70 a, M84R四丙氨酸替换ecotin-trypsin二级结合位点,随着在主站点M84R突变,有K (i)对大鼠胰蛋白酶0.2海里。的结构ecotin Y69F D70P-trypsin复杂显示轻微的结构性变化ecotin-trypsin四聚物。ecotin 67 - 70的结构,M84R突变必然胰蛋白酶显示大偏差的三级和四级结构复杂。胰蛋白酶结构显示无显著变化,但ecotin几圈地区的构象改变,从而导致二级网站发布胰蛋白酶。之前的几个地区认为是刚性的结构也大幅修改。ecotin固有的灵活性,使其适应这些突变和仍然保持紧密绑定通过蛋白质的妥协的接口在ecotin-trypsin四聚物。 A comparison with two recently described ecotin-like genes from other bacteria suggests that these structural and functional features are conserved in otherwise distant bacterial lineages.