调查的衬底绑定和pci债券裂开的酶催化组,phosphonoacetaldehyde水解酶。
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奥尔森DB,赫本TW,李SL,马丁BM,马里亚诺·PS, Dunaway-Mariano D
调查的衬底绑定和pci债券裂开的酶催化组,phosphonoacetaldehyde水解酶。
拱生物化学Biophys。1992年7月,296 (1):144 - 51。
- PubMed ID
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1605625 (在PubMed]
- 文摘
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动力学研究与底物类似物和group-directed化学改性剂进行了识别所需的es互动为目的的phosphonoacetaldehyde (P-Ald)绑定和催化水解P-Ald水解酶(phosphonatase)。丙二酸semialdehyde (Ki = 1.6毫米),phosphonoacetate (Ki = 10毫米),phosphonoethanol (Ki = 10毫米),和fluorophosphate (Ki = 20 mM)被发现是酶的竞争性抑制剂但不是基质。Thiophosphonoacetaldehyde和丙酮基膦酸酯进行水解phosphonatase-catalyzed但在20倍和140倍慢率,分别比P-Ald。在NaBH4面前,acetonyl-phosphonate灭活phosphonatase速度超过其营业额。序列分析的放射性标记的胰蛋白酶的肽产生[3-3H] acetonylphosphonate / NaBH4-treated phosphonatase透露,与催化赖氨酸席夫碱的形成发生。Vm /公里pH值和Vm配置文件的phosphonatase-catalyzed P-Ald水解、基质的最佳pH值范围的6 - 8定义绑定和催化作用。失活的pH值依赖赖氨酸乙酰化作用的活性部位与乙酸酐和2,醋酸4-dinitrophenyl证明质子化作用的活性部位赖氨酸残留物如下原因活动损失pH值6。失活的pH值依赖一个活跃的站点与甲基半胱氨酸残基methanethiol-sulfonate表明去质子化的残留可能会造成损失的酶活性高于pH值8。