Deoxycytidylate hydroxymethylase T4噬菌体的基因。核苷酸序列测定和基因的表达。
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王拉姆N, Y,马修斯CK,鲁格W
Deoxycytidylate hydroxymethylase T4噬菌体的基因。核苷酸序列测定和基因的表达。
3月15日。1988欧元;172 (3):553 - 63。
- PubMed ID
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3350013 (在PubMed]
- 文摘
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我们描述两种方法T4噬菌体克隆和基因过度表达42,这编码酶早期deoxycytidylate hydroxymethylase。在波鸿用图书馆的野生型噬菌体DNA片段克隆到M13mp18克隆筛选的已知含有的部分基因42。两个重叠的片段,每一个都包含一个基因,是裂解HincII站点和加入,给一个包含整个基因片段。在科瓦利斯1.8 kb cytosine-substituted DNA片段,认为包含整个基因克隆到pUC18列示在低水平表达的酶。克隆的片段上的琥珀突变基因42。DNA序列的基因42,克隆的基因转化为野生型等位基因定点诱变。gene-42-containing片段克隆到pT7表达系统,发现大幅过表达。dCMP hydroxymethylase纯化的过度表达菌株的转化率与酶孤立的早些时候从感染的细胞。此外,氨基20个氨基酸残基序列匹配的精确预测的基因序列。gp42熊相当大的同源的氨基酸序列与thymidylate合成酶主机或T4的起源。 The gene 42 nucleotide sequences of bacteriophages T2 and T6 were determined and found to code for amino acid sequences nearly identical to that of T4 gp42.