K + -translocating KdpFABC p型atp酶的大肠杆菌作为功能性和结构性的二聚体。
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Heitkamp T, Kalinowski R, Bottcher B,罗宋汤,Altendorf K, Greie JC
K + -translocating KdpFABC p型atp酶的大肠杆菌作为功能性和结构性的二聚体。
生物化学,2008年3月18日,47 (11):3564 - 75。doi: 10.1021 / bi702038e。Epub 2008年2月26日。
- PubMed ID
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18298081 (在PubMed]
- 文摘
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种K (+) -translocating KdpFABC复杂从大肠杆菌属于p型atp酶的总科,也有共同的结构特点以及研究催化机理。然而,对这类酶的低聚物的状态。对于许多p型atp酶,如钠(+)/ K(+)腺苷三磷酸酶,Ca(2 +)腺苷三磷酸酶,或H(+)腺苷三磷酸酶,低聚物的状态已被证明或至少是讨论但尚未详细特征。KdpFABC复杂,动力分析已经表明的存在在功能酶和腺苷合作的双方,因此,也指出的方向一个功能性低聚物。然而,这种低聚物的状态的性质尚未完全阐明。在目前的工作,密切两KdpB附近单元内的功能性KdpFABC复杂可以证明了化学交联的本地使用铜1半胱氨酸残基,10-phenanthroline。负责交联形成的半胱氨酸通过诱变。交联,non-cross-linked KdpFABC复合物筛选了相同的表观分子量凝胶过滤期间,为对应的分子量,从而清楚地表明KdpFABC复杂的提纯为二聚体。孤立KdpFABC复合物进行了分析通过透射电子显微镜和展出约1:1 mono -二聚的粒子的分布。最后,重组功能KdpFABC复合物是定点与荧光的染料标记,和分子间单分子担心分析,从单体和二聚体的离解常数平衡30至50 nM可以派生。