单步DGGE-based p53基因的突变扫描:应用基因诊断结肠直肠癌。
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Guldberg P,奈德嘎德T,尼尔森HJ,奥尔森AC, Ahrenkiel V, Zeuthen中J
单步DGGE-based p53基因的突变扫描:应用基因诊断结肠直肠癌。
哼Mutat。1997; 9 (4): 348 - 55。
- PubMed ID
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9101296 (在PubMed]
- 文摘
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我们提出一个简单的非放射性分析基于聚合酶链反应(PCR)结合变性梯度凝胶电泳(DGGE),它允许全面的整个编码序列的突变扫描和接头连接的p53基因在一个分析步骤。本方法的主要特点是(1)所有的碎片都可以放大使用一个常见的PCR协议;(2)所有的碎片都可以扫描突变在一个“广泛”变性梯度凝胶;和(3)所有的碎片都量身定做合适的GC的附件夹以及进行其他操作仅由两个域融化为了最大化解决DGGE的突变。整个过程从基因组DNA的样本可以在6小时内完成,有可能发现任何序列变异,无论p53基因的位置。突变检测灵敏度的分析证明了26构造控制p53基因的突变分布在整个。我们应用基因诊断方法43例结直肠癌。总的来说,一个点突变、microdeletion或microinsertion 26(61%)被发现的肿瘤。除了错义和移码突变的外显子4 - 8人,20个基点插入在第11外显子被发现在一个示例,说明综合基因扫描可靠诊断的重要性。