质膜上功能性雌激素受体的性质。
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李志刚，李志刚
质膜上功能性雌激素受体的性质。
Mol Endocrinol. 2006 9月;20(9):1996-2009。Epub 2006年4月27日
- PubMed ID
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16645038 (PubMed视图］
- 摘要
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虽然雌激素在质膜上的快速信号已经确定，但关于受体蛋白的性质仍有争议。雌激素可以结合类似经典核雌激素受体(ERs)的膜蛋白，但一些研究发现非经典受体，如G蛋白偶联受体(GPR)30。我们采用了几种方法来定义膜定位的雌激素结合蛋白。在ERalpha/ERbeta联合缺失小鼠的内皮细胞(ECs)中，雌二醇(E2)不能特异性结合，不能激活cAMP、ERK或磷脂酰肌醇3-激酶，也不能刺激DNA合成。这与野生型ECs形成对比，表明在ERalpha/ERbeta组合缺失的ECs中缺乏任何功能性雌激素结合蛋白。为了直接确定膜和核定位ER的身份，我们从MCF7细胞中分离出亚细胞受体池。假定的ER蛋白被胰蛋白酶消化并进行串联阵列质谱分析。输出分析鉴定膜和核e2结合蛋白为经典的人ERalpha。我们还确定了GPR30是否在E2快速作用中起作用。MCF7 (ER和GPR30阳性)和SKBR-3 (ER阴性，GPR30阳性)细胞与E2孵育。 Only MCF7 responded with significantly increased signaling. In MCF7, the response to E2 was not different in cells transfected with small interfering RNA to green fluorescent protein or GPR30. In contrast, interfering RNA to ERalpha or ER inhibition prevented rapid signaling and resulting biology in MCF7. In breast cancer and ECs, nuclear and membrane ERs are the same proteins. Furthermore, classical ERs mediate rapid signals induced by E2 in these cells.