1 h, 15 n, 13 c, 13 co作业的人类interleukin-4使用三维双,triple-resonance异核磁共振光谱学。
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3月CJ,权力R, Garrett DS,弗里登EA, Gronenborn,丁香通用
1 h, 15 n, 13 c, 13 co作业的人类interleukin-4使用三维双,triple-resonance异核磁共振光谱学。
生物化学,1992年5月5日,31(17):4334 - 46所示。
- PubMed ID
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1567880 (在PubMed]
- 文摘
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的赋值1 h, 15 n, 13 co和13 c共振重组人类interleukin-4 (il - 4)、133残留的蛋白质和分子质量15.4 kDa,提出基于一系列11三维(3 d)双- triple-resonance杂核的核磁共振实验。这些研究采用统一贴上15 n - 13和15 n / c-labeled il - 4的同位素掺入大于95%酵母表达的蛋白质。五个独立的顺序连接通过一个通路,两,三批公债杂环的J耦合利用获得明确的顺序作业。具体来说,有限公司(i) - N (i + 1), NH (i + 1) HNCO实验中观察到的相关性,CαH (i), Cα(i) - N (i + 1)相关性在HCA (CO) N实验中,Cα(i) - N (i + 1), NH (i + 1)相关性HNCA和HN (CO) CA实验中,CαH (i) - N (i + 1), NH (i + 1)相关性的H (CA) NH和HN (CO) HB实验,和CβH (i) - N (i + 1), NH (i + 1)相关性HN (CO) HB实验。骨干intraresidue CαH (i) -15 n (i) NH (i)的相关性提供15 n-edited Hartmann-Hahn (HOHAHA)和H (CA) NH实验中,CβH(我)-15 n (i) NH (i)相关性的15 n-edited HOHAHA HNHB实验,13 Cα(i) -15 n (i) NH (i) HNCA相关性的实验中,H和Cα(i) -13 Cα(i) -13公司(i) HCACO相关性的实验。脂肪族侧链的自旋系统3 d 1 h-13c-13c-1h交办相关(HCCH-COSY)和总相关(HCCH-TOCSY)光谱。因为这些实验提供的高分辨率,以及多个连续的可用性连接通路,模棱两可与有限的化学位移相关的色散与螺旋蛋白质很容易解决。进一步说,在大多数情况下(88%),四个或更多顺序相关性之间观察到连续的残留物。因此,解释这些实验中半自动的分析大大简化和加快了作业过程。本文中给出的任务提供必要的依据研究旨在确定il - 4的高分辨率三维结构的解决方案。