航天飞机结构和动力学分析质子残留在第三人类碳酸酐酶的活性部位。
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老我,费舍尔Z, Laipis PJ,你C。麦凯纳R,西尔弗曼DN
航天飞机结构和动力学分析质子残留在第三人类碳酸酐酶的活性部位。
蛋白质。2007年7月1日,68 (1):337 - 43。
- PubMed ID
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17427958 (在PubMed]
- 文摘
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我们报告的x射线晶体结构和速率常数质子转移位点突变体人类碳酸酐酶III (HCA III)放置一个组氨酸残基的活性部位腔:K64H R67H, K64H-R67N HCA三世。之前的证据之间的18 o交换二氧化碳和水以质谱显示每个突变增强质子转移与野生型相比,催化HCA III。然而,His64 K64H和K64H-R67N HCA三世最多一个质子转移的能力,只有13%的His64 HCA II。HCA III的降低率突变体与His64受限的侧链构象,面向外,从活性部位的锌晶体结构。这个构象出现稳定的突出π堆积相互作用的咪唑环His64的吲哚环Trp5 HCA III的突变体。这一取向的His64 K64H HCA三世主导在双突变体K64H-R67N HCA三世,表明正电荷Arg67并不影响His64观察构象的晶体结构。因此,这些突变体的结构和催化活性HCA三世包含His64账户只在一小部分的低活动同工酶与HCA II。His67在R67H HCA三世也被证明是一个质子残留的航天飞机,有一个质子转移的能力在K64H大约四倍的His64 HCA III。这是最有可能因其距离和方向向内朝zinc-bound溶剂。这些结果强调侧链取向的意义和范围可用构象州的一个有效的质子穿梭在碳酸酐酶的特征。