O-linked糖基化在苏氨酸27保护铜转运hCTR1哺乳动物细胞的蛋白水解乳沟。
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Maryon EB,莫雷SA,卡普兰JH
O-linked糖基化在苏氨酸27保护铜转运hCTR1哺乳动物细胞的蛋白水解乳沟。
生物化学杂志。2007年7月13日;282 (28):20376 - 87。2007年5月24日Epub。
- PubMed ID
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17525160 (在PubMed]
- 文摘
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hCTR1主要人类铜吸收蛋白质,氨基酸和190年预测21 kDa的质量。hCTR1抗体识别多个乐队在sds - page集中在35 kDa。这部分增加的质量是由于N-linked Asn-15糖基化。我们表明,哺乳动物细胞N15Q突变蛋白贩卖到质膜和介导铜吸收75%的野生型hCTR1率。我们表明,细胞外氨基酸hCTR1还包含O-linked多糖。糖苷酶治疗移除O-linked糖减少hCTR1或N15Q突变蛋白的表观质量1 - 2 kDa。表达伴截断和丙氨酸替代突变体在HEK293 hCTR1和MDCK细胞局部的O-linked Thr-27糖基化。表达式的丙氨酸替换Thr-27导致蛋白水解乳沟的羧基端的hCTR1 T27A突变。这乳沟了17-kDa多肽失踪约hCTR1的第一个30个氨基酸。表达野生型hCTR1突变中国仓鼠卵巢细胞无法启动O-glycosylation也导致hCTR1卵裂产生17-kDa多肽。 The 17-kDa hCTR1 polypeptide was located in the plasma membrane and mediated copper uptake at about 50% that of the rate of wild-type hCTR1. Thus, O-linked glycosylation at Thr-27 is necessary to prevent proteolytic cleavage that removes half of the extracellular amino terminus of hCTR1 and significantly impairs transport activity of the remaining polypeptide.