在氨基酸水平上鉴定大肠杆菌核糖体蛋白对S13-S19的交联。
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Pohl T, Wittmann-Liebold B
在氨基酸水平上鉴定大肠杆菌核糖体蛋白对S13-S19的交联。
《生物化学杂志》1988年3月25日;263(9):4293-301。
- PubMed ID
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3279034 (PubMed视图］
- 摘要
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用双功能试剂二氧丁烷作为交联剂处理大肠杆菌30s核糖体亚基和70s核糖体。30s亚基中的一个主要交联蛋白对的产量相对较高。这种交联被证明由核糖体蛋白S13和S19组成。该复合物的纯化是通过一系列常规和/或高压液相色谱技术实现的，允许其以毫克量分离。为了揭示参与交联形成的两个氨基酸的确切位置，对纯化的蛋白对S13-S19进行了多次酶裂解，并通过序列分析、氨基酸分析和快速原子轰击质谱对所得肽进行了表征。分离交联肽后，S13蛋白中的Cys84和S19蛋白中的His68被双功能试剂明确鉴定为交联的氨基酸。这一结果表明，尽管中子散射数据将S13和S19的质心分开，但至少这两个蛋白质的这些区域位于核糖体粒子中4-A的距离内。