小说突变毗邻G (Sα)的第三开关领域pseudohypoparathyroidism患者。
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华纳博士Gejman PV,柯林斯RM,温斯坦LS
小说突变毗邻G (Sα)的第三开关领域pseudohypoparathyroidism患者。
摩尔性。1997年10月,11(11):1718 - 27所示。
- PubMed ID
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9328353 (在PubMed]
- 文摘
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小说G (Sα)突变编码250年精氨酸,丝氨酸替代(G (Sα)S250R)被发现在一个病人pseudohypoparathyroidism Ia型。G (S)活动和G(α)表达在红血球膜减少了约50%的病人的影响。互补脱氧核糖核酸的G (Sα)突变体,以及一个S250残留物被删除(G (Sα)-deltaS250),生成和的生化特性产品的体外转录/翻译检查。两个突变体的沉降系数类似野生型G (Sα)(约3.7秒)后,保持在0 C合成。然而30-37 C维持1 - 2 h时,这两个突变体聚合材料沉积在大约6.3秒或更高(G (Sα)-S250R在更大程度上比G (Sα]-deltaS250),而野生型G (Sα)沉淀在大约3.7年代,表明突变体是热不稳定的。孵化的高剂量的鸟嘌呤核苷酸部分预防热变性的G (Sα)deltaS250但对G (S alpha-S250R没有保护作用。蔗糖密度梯度离心法在的存在和缺乏β0 C gamma-dimers表明,与野生型相比G (Sα)突变体都无法与βγ。胰蛋白酶保护化验显示没有保护的G (Sα)-S250R GTPgammaS或AIF4——在任何温度下。GTPgammaS授予适度保护G (Sα)-deltaS250(大约50%的野生型Gα[S])在30度但没有37 C,而AIF4——授予轻微的保护在20 C但没有在30摄氏度以上。与这个结果一致,G (Sα)-deltaS250能够刺激腺苷酸环化酶在30度的重组与本体膜在GTPgammaS但不是AIF4——的存在。 G(S alpha)-S250R showed no ability to stimulate adenylyl cyclase in the presence of either agent. Stable transfection of mutant and wild-type G(S alpha) into cyc- S49 lymphoma cells revealed that the majority of wild type G(S alpha) localized to membranes, while little or no membrane localization occurred for either mutant. Modeling of G(S alpha) based upon the crystal structure of G(t alpha) or G(i alpha) suggests that Ser250 interacts with several residues within and around the conserved NKXD motif, which directly interacts with the guanine ring of bound GDP or GTP. It is therefore possible that substitution or deletion of this residue may alter guanine nucleotide binding, which could lead to thermolability and impaired function.