测序、克隆和表达人类的红色程控酸性磷酸酶,细胞质phosphotyrosyl蛋白磷酸酶。
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我们YY,麦考马克,Shabanowitz J,亨特DF,戴维斯JP,米切尔GL,范Etten RL
测序、克隆和表达人类的红色程控酸性磷酸酶,细胞质phosphotyrosyl蛋白磷酸酶。
J生物化学杂志。1992年5月25日,267 (15):10856 - 65。
- PubMed ID
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1587862 (在PubMed]
- 文摘
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低分子量phosphotyrosyl蛋白磷酸酶的人类胎盘和人类红细胞被纯化和测序埃德曼降解和串联质谱分析。筛选的人类胎盘λgt11 cDNA文库产生重叠cDNA克隆编码两个截然不同的人类细胞质低分子量phosphotyrosyl蛋白质磷酸酶(HCPTPs)。最长两个克隆,指定HCPTP1-1 HCPTP2-1,被发现有相同的核苷酸序列,除了108碱基对段中间的开放阅读框。与人类基因组DNA聚合酶链反应研究表明HCPTP1-1之间的区别和HCPTP2-1并不源于替代RNA拼接。研究人类染色体2-specific图书馆证实,这些序列是位于染色体2,这是红色细胞酸性磷酸酶的位置轨迹ACP1。HCPTP1-1编码序列和HCPTP2-1被从噬菌体T7启动子下游,蛋白质在大肠杆菌表达。由此产生的重组酶(分别指定HCPTP-A和HCPTP-B)分子量18000的钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳,和他们表现出与抗血清免疫反应性提高了对真实的人类胎盘和牛心酶。表达蛋白是高度活跃的对硝基苯磷酸磷酸酶底物,beta-naphthyl磷酸盐、O-phospho-L-tyrosine,但不是alpha-naphthyl磷酸盐,磷酸苏氨酸或O-phospho-L-serine。HCPTP-A和有效- b具有相同的氨基酸成分,免疫反应性,抑制了甲醛、和动力学特性与两个人类红细胞相比酸性磷酸酶同功酶。得出HCPTP-A和- b是快和慢的形式的红色细胞酸性磷酸酶,分别,这种酶并不是唯一的表达的红细胞而是所有人体组织。