两个真核转录因子的磷酸化,小君二聚蛋白2和激活转录因子2,小君氨基端激酶在大肠杆菌。
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日本村田公司T, Shinozuka Y, Obata Y, Yokoyama KK
两个真核转录因子的磷酸化,小君二聚蛋白2和激活转录因子2,小君氨基端激酶在大肠杆菌。
学生物化学肛门。2008年5月1日,376(1):115 - 21所示。doi: 10.1016 / j.ab.2008.01.038。Epub 2008年2月6日。
- PubMed ID
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18307971 (在PubMed]
- 文摘
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重组真核蛋白质经常在大肠杆菌生产等蛋白质通常用于生化研究体外。然而,蛋白质产生这样不修改化学,例如,通过磷酸化,乙酰化、甲基化、sumoylation,或泛素化,在细菌细胞的合成。我们构造向量在大肠杆菌表达人类小君的氨基端激酶1 (JNK1),鼠标极光激酶B (Aurkb),组蛋白乙酰转移酶(HAT)和P / CAF的领域。这些表达向量包括p15A的起源的复制和复制pBR322或ColE1的起源。使用这些表达载体在大肠杆菌中,我们能够使磷酸化老鼠和人类小君二聚蛋白2 (JDP2)和人工激活转录因子2 (ATF-2)同时人类JNK1表达的作用。此外,老鼠的尾巴区域组蛋白H3磷酸化和乙酰化,分别通过Aurkb和P / CAF的帽子域。我们还观察到与JDP2 ATF-2之间的相互作用是阻止ATF-2磷酸化时。我们enzyme-modified蛋白质在大肠杆菌表达系统生产应该广泛适用的生化研究和有用的化学改性真核蛋白质体外。