定点化学转化的丝氨酸半胱氨酸写明ATCC 11105年青霉素酰基转移酶的大肠杆菌。对构象和催化活性的影响。
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斯莱德,Horrocks AJ,林赛CD,邓巴B, Virden R
定点化学转化的丝氨酸半胱氨酸写明ATCC 11105年青霉素酰基转移酶的大肠杆菌。对构象和催化活性的影响。
4月10欧元。1991;197 (1):75 - 80。
- PubMed ID
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1849824 (在PubMed]
- 文摘
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青霉素酰基转移酶(EC 3.5.1.11)完全灭活克分子数相等的甲苯(35 s)磺酰氟(PhMe35SO2F);磺酰小组修改后的蛋白质的稳定性是由测量放射性的超滤液。8 M尿素,磺酰集团的损失是类似于观察PhMeSO2F-inactivated胰凝乳蛋白酶(黄金、点& Fahrney d(1964)生化3,783 - 791]。孵化的PhMeSO2F-inactivated酰基转移酶与0.7钾thioacetate产生一个acetylthiol酶随后转换为thiol-enzyme孵化期间10毫米6-aminopenicillanic酸。4-Pyridyl-ethylcysteine公布了酸水解反应后与4-vinylpyridine thiol-protein。的利率反应thiol-penicillin酰基转移酶与碘乙酸和2,2 '联吡啶二硫化物符合一个不完全的存在可以半胱氨酰sidechain。carboxymethylating thiol-enzyme后用碘2-3H乙酸,通过SDS /页面显示的标签是和测序分析有关专门与beta-chain NH2-terminal残渣,指示转换Ser290 S-carboxymethyl-cysteine。近紫外CD光谱显示的构象thiol-penicillin酰基转移酶是难以区分的本机蛋白质,但催化活性低于0.02%的正常的酶。Ser290作为亲核试剂在催化的可能性进行了探讨。