青霉素酰基转移酶的晶体结构es复合物:结构洞察催化机制。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
借债过度,沃尔什马,道森GG,威尔逊KS,争吵农协
青霉素酰基转移酶的晶体结构es复合物:结构洞察催化机制。
J杂志。2001年10月12日,313 (1):139 - 50。
- PubMed ID
-
11601852 (在PubMed]
- 文摘
-
青霉素G酰基转移酶的晶体结构从大肠杆菌一直决心解决1.3从晶体生长在乙二醇的存在形式。底物特异性和催化机理的研究方面的关键生物技术酶突变体是产生活性蛋白质用于生产es复合物。由于亲密协会酶活性和蛋白质前体加工在这个家庭(请厂家化水解酶),大多数试图改变活性部位残留导致加工缺陷。突变的不变的残渣Arg B263导致蛋白质前体形式的积累。然而,Asn B241的突变,残渣与稳定的四面体中间在催化,使酶失去活性,但并不妨碍催化处理或结合底物的能力。Asn B241 Ala oxyanion洞的晶体结构突变酶已经决定在其原生形式和复杂的青霉素G和青霉素G亚砜。我们表明,Asn B241一个重要的角色在维持活性部位几何和富有成效的衬底绑定,因此突变蛋白的结构是一个贫穷的米歇利斯模型复杂。出于这个原因,我们随后解决野生型蛋白的结构与慢慢地处理复杂基质青霉素G亚砜。对这种结构的分析表明,反应机理收益通过直接亲核攻击的Ser B1易裂开的酰胺,而不是通过严格H-bonded正如前面提出的水分子作为一个“虚拟”基地。