大鼠棕色脂肪组织中肼与氨基脲敏感胺氧化酶的相互作用。它被用作酶的放射性配体。
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Barrand MA, Callingham BA
大鼠棕色脂肪组织中肼与氨基脲敏感胺氧化酶的相互作用。它被用作酶的放射性配体。
生物化学杂志1985年12月1日;232(2):415-23。
- PubMed ID
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4091799 (PubMed视图］
- 摘要
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联氨嗪是一种强有力的不可逆抑制剂，可抑制褐色脂肪中的氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)。最初，它可能作为一种竞争性抑制剂作用于酶，但不可逆的抑制迅速发生在浓度和温度依赖的方式。已知作为酶底物的伯胺的存在，而不是不被SSAO代谢的仲胺的存在，降低了这种失活率，而去除O2则没有效果。联氨嗪失活SSAO的动力学模式与活性位点定向的可饱和位点结合以及不可逆酶抑制剂复合物的发展相一致。[3H]联氮嗪被用作SSAO的亲和标记，与棕色脂肪膜显示可饱和结合。这种结合被SSAO的其他抑制剂所抑制。酶与含有SSAO的膜颗粒的结合速率不受底物的影响。然而，如果使用可溶性部分纯化的SSAO制剂，则在SSAO底物苄胺的存在下，结合速率降低。Triton X-100在洗涤剂/蛋白质比例下从[3H]联氨氮处理的膜颗粒中溶解的3H标记材料从膜中释放SSAO，显示出与SSAO相同的凝胶过滤特性，并且通过扁豆凝集素-琼脂糖亲和层析显示含有相似的碳水化合物部分。经凝胶过滤和亲和层析部分纯化的3h标记材料，在十二烷基硫酸钠/聚丙烯酰胺-凝胶电泳上主要产生单一的放射性带。 The position of this band corresponds to an Mr of about 94 000, almost exactly half the Mr already estimated for the functional unit of SSAO. Radiolabelled hydralazine may thus be used as a label for purified SSAO, but it is not specific enough to be suitable as a ligand in vivo.