使用基因融合检查膜拓扑的L-subunit光合反应中心和群体bc1复杂的细胞色素b亚基Rhodobacter sphaeroides。
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老云CH,范多伦、克罗夫茨AR Gennis RB
使用基因融合检查膜拓扑的L-subunit光合反应中心和群体bc1复杂的细胞色素b亚基Rhodobacter sphaeroides。
J生物化学杂志。1991年6月15日,266 (17):10967 - 73。
- PubMed ID
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1645718 (在PubMed]
- 文摘
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细胞色素b亚基的拓扑结构的复杂群体bc1 Rhodobacter sphaeroides已经检查通过生成与碱性磷酸酶基因融合。基因融合生成随机位置在fbcB基因编码细胞色素b亚基。这些融合产品被表达在大肠杆菌和碱性磷酸酶筛查活动显色板。33在坐标系融合显示活动进一步表征。所有这些融合的融合连接有一个高的特定活动都集中在三个区域细胞色素b多肽,因此这些地区被初步分配是周质的表面附近。数据符合一个包含八个跨膜螺旋模型。为了探索一种蛋白质的基因融合方法的有效性通常不表达在大肠杆菌中,拓扑的L-subunit光合反应中心使用phoA从r . sphaeroides也探索基因融合。使用类似的协议与细胞色素b亚基。高的基因融合的具体活动被证明是地区L-subunit多肽已知在或接近周质的表面,所定义的高分辨率结构由x射线晶体学。这些数据表明这种方法的实用程序,用于确定膜蛋白拓扑和潜在的应用扩展到包括至少部分通常不是在大肠杆菌表达的蛋白质。