人电子转移黄蛋白-泛素氧化还原酶cDNA的克隆与表达。
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Goodman SI, Axtell KM, Bindoff LA, Beard SE, Gill RE, freeman FE
人电子转移黄蛋白-泛素氧化还原酶cDNA的克隆与表达。
中国生物化学杂志，1994年1月15日;21(1-2):277-86。
- PubMed ID
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8306995 (PubMed视图］
- 摘要
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线粒体膜内的电子转移黄蛋白-泛素氧化还原酶(ETF-QO)接受位于线粒体基质中的电子转移黄蛋白的电子，还原线粒体膜中的泛素。蛋白质中的两个氧化还原中心FAD和[4Fe4S]+2，+1簇存在于一个64 kda单体中。我们克隆了几个编码猪ETF-QO大部分基因的cDNA序列，并用它们作为探针克隆了一个全长的人ETF-QO cDNA。推导出的人ETF-QO序列预测了一个含有617个氨基酸(67 kDa)的蛋白质，两个与FAD假体基团AMP部分结合相关的结构域，两个膜螺旋和一个含有4个半胱氨酸残基的基序，这些残基通常与铁氧还原蛋白样铁硫簇的配体相关。在67-kDa蛋白的氨基端也预测了一个可切割的33个氨基酸序列，该序列将该蛋白靶向到线粒体。体外转录和翻译产生了67 kda的免疫可沉淀产物，正如从cDNA的开放阅读框预测的那样。人类的cDNA在酿酒酵母中表达，而酿酒酵母通常不合成这种蛋白质。ETF-QO被合成为67-kDa前体，靶向线粒体，并在一步中加工成位于线粒体膜中的64-kDa成熟形式。洗涤剂溶解的蛋白质将电子从ETF转移到泛素同源物Q1，这表明FAD和铁-硫簇都正确地插入到异源表达的蛋白质中。