帕金是由PINK1-dependent磷酸化激活泛素在Ser65。
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Kazlauskaite, Kondapalli C,古尔R,坎贝尔DG, Ritorto女士,霍夫曼K,阿莱西博士,Knebel, Trost M, Muqit毫米
帕金是由PINK1-dependent磷酸化激活泛素在Ser65。
j . 2014 5月15日,460 (1):127 - 39。doi: 10.1042 / BJ20140334。
- PubMed ID
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24660806 (在PubMed]
- 文摘
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我们以前报道,帕金森疾病相关激酶PINK1 (PTEN-induced假定的激酶1)由线粒体去极化激活,刺激帕金E3连接酶通过磷酸化Ser65在其Ubl (ubiquitin-like)域。使用phosphoproteomic分析,我们发现了一个新奇的泛素在此处则磷酸化在Ser65丰富14倍HEK(人类胚胎肾)-293个细胞overexpressing野生型PINK1挺刺激与线粒体解偶联剂(羰基氰化物法),激活PINK1,而细胞表达激酶PINK1。Ser65泛素在于类似主题的Ser65 Ubl帕金领域。值得注意的是,直接PINK1磷酸化Ser65泛素的体外。我们进行了一系列的实验,提供了引人注目的证据表明Ser65-phosphorylated泛素(ubiquitinPhospho-Ser65)函数作为帕金的关键催化剂。首先,我们证明的一个片段帕金缺乏Ubl域包括Ser65 (DeltaUbl-Parkin)由ubiquitinPhospho-Ser65强劲激活,但不是通过non-phosphorylated泛素。其次,我们发现孤立帕金Ubl域磷酸化在Ser65 (UblPhospho-Ser65)也可以激活DeltaUbl-Parkin ubiquitinPhospho-Ser65类似。第三,我们建立ubiquitinPhospho-Ser65,但不是non-phosphorylated泛素或UblPhospho-Ser65,激活全身的野生型帕金以及non-phosphorylatable S65A帕金突变。第四,我们提供的证据表明,最佳长篇帕金E3连接酶的激活依赖于PINK1-mediated磷酸化在Ser65帕金和泛素在Ser65,因为只有突变的蛋白质在Ser65完全废除帕金激活。总之,本研究的结果显示,PINK1控制帕金E3连接酶活性不仅通过磷酸化在Ser65帕金,而且通过磷酸化在Ser65泛素。 We propose that phosphorylation of Parkin at Ser65 serves to prime the E3 ligase enzyme for activation by ubiquitinPhospho-Ser65, suggesting that small molecules that mimic ubiquitinPhospho-Ser65 could hold promise as novel therapies for Parkinson's disease.