结构洞察如何抗独特型抗体D3H44(抗组织因子抗体)恢复正常凝血。
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Eigenbrot C，孟YG, Krishnamurthy R, Lipari MT, Presta L, Devaux B, Wong T, Moran P, Bullens S, Kirchhofer D
结构洞察如何抗独特型抗体D3H44(抗组织因子抗体)恢复正常凝血。
中华分子生物学杂志，2003 8月8日;331(2):433-46。
- PubMed ID
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12888350 (PubMed视图］
- 摘要
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6A6是一种针对人源化抗组织因子抗体D3H44的小鼠单克隆抗体。6A6能够完全中和D3H44在组织因子依赖性功能测定中的抗凝血活性，如内毒素诱导的全血凝血，凝血酶原时间，以及因子X和因子IX激活。elisa检测进一步表明，6A6与D3H44的V(L)结构域上的关键决定因素表位结合。利用2.5A分辨率测定的6A6- fab /D3H44-Fab复合物的x射线结构，研究了抗独特型6A6可能携带原始抗原(组织因子)的“内部图像”的可能性。我们发现6A6在结构上模仿组织因子的程度仅限于它与D3H44的抗原识别表面结合。虽然6A6与D3H44的V(L)和V(H)结构域都有接触，组织因子也有接触，但相对于D3H44上的组织因子接触，6A6与D3H44 V(L)结构域的接触更多，与D3H44 V(H)结构域的接触更少。此外，在氨基酸侧链官能团水平上，6A6与组织因子之间几乎完全缺乏对应关系。尽管组织因子和6A6都主要由β -sheet组成，但它们呈现出与D3H44完全不同的二级结构元素;组织因子呈β -片状，而6A6以环状为主。最后，6A6与组织因子竞争D3H44结合的发现提高了使用6A6作为D3H44抗凝治疗解药的可能性。 To this end, we constructed a chimeric murine/human 6A6-Fab, which effectively neutralized D3H44 and fully restored tissue factor function in enzymatic assays.