雄激素和雌激素反应性生物测定的开发，基于人类细胞系的高选择性类固醇反应性生物测定小组的成员。
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索内维尔德E，杨森HJ，瑞特科JA，布鲁维尔A，范德伯格B
雄激素和雌激素反应性生物测定的开发，基于人类细胞系的高选择性类固醇反应性生物测定小组的成员。
中国药理学杂志2005 01;83(1):136-48。Epub 2004 10月13日。
- PubMed ID
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15483189 (PubMed视图］
- 摘要
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我们建立了高度敏感和特异性的雄激素和雌激素报告细胞系，我们分别将其命名为AR(雄激素受体)和ERalpha(雌激素受体α) CALUX(化学激活荧光素酶表达)。这两种生物测定都是CALUX报告细胞系的一组成员，这些报告细胞系来源于人类U2-OS骨肉瘤细胞系，它们都使用基于与多聚化反应元件相连的基础启动子元件的高选择性报告结构，可以有效和特异性地测量干扰雄激素、雌激素、孕酮和糖皮质激素受体的化合物。AR CALUX生物测定包含人类雄激素受体和荧光素酶报告结构，其中包含三个雄激素反应元件耦合到一个最小的TATA启动子。该细胞系的特点是AR蛋白的稳定表达，对低水平的不同天然和合成雄激素的高度选择性反应，对其他核激素受体配体如雌激素、孕激素和糖皮质激素的反应不明显。二氢睾酮(DHT)的EC50为0.13 nM，与该配体对人AR的高亲和力一致。氟他胺、醋酸环丙孕酮、环境污染物vinclozolin、DDT、甲氧氯胺及其代谢产物HPTE和penta-BFR在AR CALUX生物测定中表现出明显的拮抗活性，竞争性地抑制DHT介导的转激活。建立的AR CALUX生物测定法被证明在易于细胞系维护、高倍诱导范围(通常是溶剂对照的30倍)、低最低检测限(3.6 pM)和高雄激素选择性方面表现出色。讨论了潜在的应用，如测试纯化学品和药物以及复杂混合物(环境，食品，饲料和临床)的雄激素或雌激素活性。