一种新型尿激酶抑制剂的纯化与表征。等离子体定量和初步表征。

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邓普顿DC，西恩庞特M，科伦D

一种新型尿激酶抑制剂的纯化与表征。等离子体定量和初步表征。

生物化学杂志，1986年9月25日;261(27):12759-66。

PubMed ID

3091604 (PubMed视图

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摘要

人尿液中的尿激酶相关蛋白主要以尿激酶与抑制剂的1:1复合物的形式出现(Stump, d.c.， Thienpont, M.和Collen, D. (1986) J. Biol。化学261,1267-1273)。用该尿激酶-尿激酶抑制剂复合物免疫BALB/c小鼠，脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，产生单克隆抗体。利用三种与该复合物反应而不与尿激酶反应的抗体，建立了尿激酶抑制剂的敏感(0.5 ng/ml)酶联免疫吸附试验，用于锌螯合物- sepharose、豆糖苷a - sepharose、SP-Sephadex C-50和Sephadex G-100色谱法监测其纯化情况。以40微克/升尿的产量和320的纯化因子，获得了表观Mr 50,000的均一糖蛋白。1 mg纯化蛋白在37℃下30分钟内抑制35000 IU尿激酶。该蛋白与纯化的尿激酶-尿激酶抑制剂复合物和通过亲核解离从其分离的抑制剂部分具有免疫相关性。它在免疫学上不同于所有已知的蛋白酶抑制剂，包括内皮细胞来源的组织型纤溶酶原激活剂的快速作用抑制剂，尿激酶的胎盘抑制剂和蛋白酶连接蛋白。在电泳中，蛋白质以β迁移率迁移。尿激酶抑制发生在二级速率常数(k) 8 × 10(3) M-1 s-1时，不存在，9 × 10(4) M-1 s-1时，存在50 IU肝素/ml。尿激酶抑制剂对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和纤溶酶无活性，但对k低于10(3)M-1 s-1的两链组织型纤溶酶原激活剂和k为4 × 10(4) M-1 s-1的凝血酶无抑制作用，对肝素存在的2 × 10(5) M-1 s-1有抑制作用。 The concentration of this urokinase inhibitor in plasma from normal subjects determined by immunoassay was 2 +/- 0.7 micrograms/ml (mean +/- S.D., n = 25). The protein purified from plasma by immunoabsorption had the same Mr, amino acid composition, and immunoreactivity as the urinary protein. Furthermore, when urokinase was added to plasma, time-dependent urokinase-urokinase inhibitor complex formation was observed at a rate similar to that observed for the inhibition of urokinase by the purified inhibitor from urine. This urokinase inhibitor, purified from human urine, most probably represents a new plasma protease inhibitor.

引用本文的药物库数据

药物靶点

药物	目标	种类	生物	药理作用	行动
Tenecteplase	纤溶酶原激活物抑制剂2	蛋白质	人类	未知的	不可用	细节