cis-proline残渣的角色在DsbA的活性部位。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Charbonnier JB,贝林P Moutiez M,锋EA, Quemeneur E
cis-proline残渣的角色在DsbA的活性部位。
蛋白质科学。1999年1月,8 (1):96 - 105。
- PubMed ID
-
10210188 (在PubMed]
- 文摘
-
除了Cys-Xaa-Xaa-Cys图案位置30-33,DsbA,二硫键形成的必不可少的催化剂与其他氧化还原酶细菌的周质股票硫氧还蛋白家族的一个cis-proline邻近的活性位点残基。残DsbA变体(P151A),这改变了丙氨酸,几乎等排的残留不倾向于采用顺式构象。替换DsbA强烈不稳定结构,由自由能的减少折叠。硫醇的pKa Cys30只是略微下降。虽然体内变异似乎是正确氧化,它表现出一个活动不到一半的野生型酶与碱性磷酸酶的折叠,作为记者的周质中二硫键的形成。DsbA (P151A)结晶的晶体形式不同于野生型蛋白,在空间群P2(1)有六个分子不对称单位。2.8 x射线结构决心解决。最重要的构象变化发生在活性部位。循环149 - 152采用了新的骨干构象与Ala151反式构象。这重排导致损失的范德瓦耳斯这个循环之间的相互作用和二硫键。 His32 from the Cys-Xaa-Xaa-Cys sequence presented in four out of six molecules in the asymmetric unit a gauche conformation not observed in the wild-type protein. The X-ray structure and folding studies on DsbA(P151A) were consistent with the cis-proline playing a major role in the stabilization of the protein. A role for the positioning of the substrate is discussed. These important properties for the enzyme function might explain the conservation of this residue in DsbA and related proteins possessing the thioredoxin fold.