神经生长因子和表皮生长factor-stimulated易位的ADP-ribosylation factor-exchange因素GRP1 PC12细胞的质膜需要激活磷脂酰肌醇3-kinase和GRP1 pleckstrin同源域。
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Venkateswarlu K,信息F, Oatey PB, Tavare JM,卡伦PJ
神经生长因子和表皮生长factor-stimulated易位的ADP-ribosylation factor-exchange因素GRP1 PC12细胞的质膜需要激活磷脂酰肌醇3-kinase和GRP1 pleckstrin同源域。
j . 1998 10月1日,335 (Pt 1): 139 - 46所示。
- PubMed ID
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9742223 (在PubMed]
- 文摘
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ADP-ribosylation因素(arf)小GTP-binding蛋白是真核细胞囊泡贩卖的监管机构。GRP1属于一个家庭的ARF guanine-nucleotide-exchange因素结合体外脂质第二信使磷脂酰肌醇3、4,5-trisphosphate [PtdIns (3、4、5) P3]。为了研究PtdIns的影响(3、4、5)P3 GRP1功能,我们克隆的人类GRP1同系物,编码一种蛋白质相同的老鼠的大脑GRP1 98.8%。人类GRP1绑定,通过其pleckstrin同源性(PH)领域,肌醇头群PtdIns P3(3、4、5),肌醇1,3,4,5-tetrakisphosphate (Ins (1、3、4、5) P4),具有高亲和力(Kd 32。2 + / -5.2 nM)和磷酸肌醇特异性(Kd值Ins (1、3、4、5、6) P5, InsP6, Ins (1, 3, 4) P3和Ins (1、4、5) P3: 283 + / -32 > 10000 > 10000 > 10000海里,分别)。此外,GRP1可以容纳添加甘油或diacetylglycerol 1-phosphate的Ins (1、3、4、5) P4,数据符合了作为公认的PtdIns P3受体(3、4、5)。地址是否GRP1结合PtdIns (3、4、5) P3体内,我们表达了嵌合体的绿色荧光蛋白(GFP)的n端融合GRP1 PC12细胞,使用共焦显微镜,研究其合成定位在活细胞。刺激神经生长因子和表皮生长因子(在100 ng / ml)导致快速,PH-domain依赖,易位的GFP-GRP1细胞溶质质膜,它发生的时间进程与生产PtdIns P3 (3、4、5)。这种易位是依赖于激活磷脂酰肌醇3-kinase,因为它是被渥曼青霉素(100海里),LY294002 (50 microM)和co-expression负面p85占主导地位。综合这些数据有力地表明,GRP1体内与等离子体相互作用membrane-located PtdIns (3、4、5) P3,因此构成一个真正PtdIns P3受体(3、4、5)。