克隆和表达人类75 kda的肌醇polyphosphate-5-phosphatase。
文章的细节
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引用
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罗斯TS,杰弗逊AB,米切尔CA, Majerus PW
克隆和表达人类75 kda的肌醇polyphosphate-5-phosphatase。
J生物化学杂志。1991年10月25日,266 (30):20283 - 9。
- PubMed ID
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1718960 (在PubMed]
- 文摘
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肌醇polyphosphate-5-phosphatase (5-phosphatase)水解肌醇1,4,5-trisphosphate和肌醇1,3,4,5-tetrakisphosphate从而函数作为一个信号终止酶在细胞钙离子动员。cDNA编码人类血小板5-phosphatase融合蛋白已经被筛查孤立的β-半乳糖结合肌醇1,3,4,5-tetrakisphosphate。筛选过程的敏感性增强50 - 100倍放大的“子程序库”之前进行绑定化验。序列来自“表达克隆”被用来屏幕人类红白血病细胞株和巨核细胞的细胞系cDNA库。我们得到了两个额外的克隆由2381个碱基对。伴氨基酸序列从75 - kda 5-phosphatase纯化从血小板是相同的氨基酸38-56互补的预测。这表明血小板5-phosphatase是由蛋白水解处理更大的前兆。互补脱氧核糖核酸预测,成熟酶含有635个氨基酸(72先生,891)。抗体针对TrpE重组融合蛋白的一个伴区域或羧基末端区域免疫沉淀反应制备的酶活性75 kda的血小板5-phosphatase (II型),但不沉淀不同47-kDa 5-phosphatase (I型)还发现血小板。此外,Cos-7细胞表达的重组蛋白具有相同的血小板5-phosphatase 5-phosphatase活动。