识别、和rac1基因产物、低分子质量GTP-binding蛋白质从人类血小板。
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奈文斯Polakis PG,韦伯射频,B, Didsbury JR,埃文斯T,南希·R
识别、和rac1基因产物、低分子质量GTP-binding蛋白质从人类血小板。
生物化学杂志。1989年10月5日;264 (28):16383 - 9。
- PubMed ID
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2550440 (在PubMed]
- 文摘
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识别GTP-binding蛋白质从人类血小板微粒分数达到了通过连续的柱层析法纯化步骤氨基酸测序紧随其后。提高识别的可能性GTP-binding蛋白质,两个化验是用来监控GTP-binding活动:(i)鸟苷5 ' -三磷酸(3 - [35 S]含硫的)(三磷酸鸟苷伽马S)绑定其次是快速过滤和ii) [alpha-32P] GTP-binding后钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳和electroblotting硝化纤维膜上。后者分析允许的隔离28-kDa GTP-binding蛋白质绑定(alpha-32P)与三磷酸鸟苷三磷酸鸟苷突出但只是缺乏发现伽马S-binding化验。三肽的氨基酸序列片段来自28-kDa蛋白质是相同区域的氨基酸序列推导出从猴、cDNA除了保守替换(Asp147——Glu)。人类文化、全长cDNA分离从胎盘cDNA文库,并推导出其氨基酸序列,与猴、相比,也包含了Asp——Glu替换以及另外两个替换和一个额外的三个NH2-terminal氨基酸。除了28-kDa蛋白质,两个截然不同的25-kDa GTP-binding蛋白质纯化从血小板。这些蛋白质之一,是以前G25K特征,丰富的低分子质量GTP-binding蛋白质。部分氨基酸序列获得第二个不明25-kDa蛋白质表明它是rac1基因的产物;一个新发现的基因家族中的一员,编码为低分子质量GTP-binding蛋白质(Didsbury J。韦伯,水、Bokoch g M。埃文斯,T。, and Snyderman, R. (1989) J. Biol. Chem. 264, 16378-16382). These results identify two new GTP-binding proteins in human platelets, ral, the major protein that binds [alpha-32P]GTP on nitrocellulose transfers, and rac1, a substrate for botulinum C3 ADP-ribosyltransferase.