突变Gly721改变DNA拓扑异构酶我活跃的网站架构,对喜树碱的敏感性。
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van der Merwe M, Bjornsti马
突变Gly721改变DNA拓扑异构酶我活跃的网站架构,对喜树碱的敏感性。
J生物化学杂志。2008年2月8日,283(6):3305 - 15所示。Epub 2007年12月4。
- PubMed ID
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18056711 (在PubMed]
- 文摘
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DNA拓扑异构酶I (Top1p)催化超螺旋DNA的放松通过DNA链的乳沟和religation协同机制。Top1p细胞目标的抗癌药物喜树碱(CPT),可逆地稳定共价enzyme-DNA中间。Top1p夹在双螺旋DNA,其中的核心和c端域通过扩展阿尔法螺旋(连接器领域),哪个位置的活动网站酪氨酸c端域内催化的口袋里。链接器的物理连接Top1p夹以及链接器的灵活性影响酶对CPT的敏感性。晶体数据显示,守恒的g残渣(位于链接器之间的接缝和c端域)的一端是一个短的α螺旋,延伸到活动网站酪氨酸共价链接到DNA。的药物,链接器是刚性的,这阿尔法螺旋延伸到包括通用电气和前面的低浓缩铀。我们报告这个保守的g在酵母突变Top1p改变酶对CPT的敏感性。变异g Asp, Glu、Asn Gln,亮氨酸,阿拉巴马州或增强酶CPT敏感性,与酸性残基诱导的最大增加体内和体外药物敏感性。相比之下,Val或者板式换热器取代基酶CPT-resistant呈现。Mutation-induced改变前活跃站点酪氨酸酶架构建议这些结构性转换调节酶对CPT的敏感性,同时增强DNA裂解率。我们假定这种守恒的g残留提供了一个灵活的铰链在Top1p催化口袋方便链接器动力学和结构变化伴随药物共价enzyme-DNA中间的绑定。