识别topaquinone及其共识序列在铜胺氧化酶类。
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琼斯SM, Palcic MM, Scaman CH,史密斯AJ,布朗德Dooley DM,幽禁M, Klinman JP
识别topaquinone及其共识序列在铜胺氧化酶类。
生物化学。1992年12月8日,31 (48):12147 - 54。
- PubMed ID
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1457410 (在PubMed]
- 文摘
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活性位点的性质代数余子式和氨基酸序列侧翼这个结构已经确定一系列铜胺氧化酶类。从猪血浆酶、猪肾、豌豆苗,蛋白酶解进行苯腙或p-nitrophenylhydrazone衍生品。嗜热菌蛋白酶治疗会导致活性部位肽相对较小,已埃德曼降解和共振拉曼光谱的特征。共振拉曼光谱肽显示相同的峰位置和强度相对于彼此,到模型p-nitrophenylhydrazone的导数topaquinone乙内酰脲,建立topaquinone代数余子式的每个实例。埃德曼降解的多肽提供活性位点序列相比之前的决定与牛血清和酵母胺氧化酶类。可用的数据建立一个共识序列Asn, Topa, Asp / Glu。胰蛋白酶导致大大延长肽,它揭示了高度的序列之间的身份从牛和猪血浆蛋白(89%),显著降低身份之间的猪血清和细胞内的胺氧化酶类(56%)。较低程度的身份(45%)是观察之间的豌豆苗和哺乳动物的酶。作为替代topaquinone隔离活性位点的肽的识别、可见光谱完整的蛋白质进行了调查。表明p-nitrophenylhydrazone衍生品的原生酶活跃site-derived肽,和topaquinone模型表现出相同的行为,在457 - 463纳米吸收中性pH值(pH值7.2),在575 - 587海里(1 - 2 M KOH)基本解决方案。 These spectral properties, which appear unique to topaquinone, provide a rapid and simple test for the presence of this cofactor in intact enzymes.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)