葡糖苷酶II的heterodimeric结构需要为其活动,溶解度和本地化体内。
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Pelletier MF,马,科洛G, Jakob CA, Tessier,伸出的礼拜堂E, Menard R, Bergeron JJ,托马斯DY
葡糖苷酶II的heterodimeric结构需要为其活动,溶解度和本地化体内。
糖生物学。8月2000;10(8):815 - 27所示。
- PubMed ID
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10929008 (在PubMed]
- 文摘
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葡糖苷酶II是一个ER heterodimeric酶劈开两个内层的alpha -顺序,从N-linked 3-linked葡萄糖残基低聚糖对新生的糖蛋白。这种处理允许绑定和释放monoglucosylated(相关(1)人(9)GlcNAc(2)糖蛋白calnexin和calreticulin lectin-like的内质网的陪伴。我们有孤立的两个cDNA亚型的人类α亚基由66个基点(α1和alpha2)不同,和相应的cDNAβ亚基。α1和alpha2形式截然不同的机动性在sds - page和细胞系的表达在大多数我们已经测试,但缺席葡糖苷酶II-deficient细胞系PHA 2.7 (R)。使用COS7细胞,coexpressionβ亚基的催化α亚基被发现的关键酶活性,增溶,和/或稳定,ERα/β的保留复杂。转染细胞提取物与β亚基表达α1或alpha2形式显示出类似的活动,而变异()亲核试剂(D542N)预测糖苷水解酶家族的31个活性部位共识序列废除酶活性。为了比较的动力学参数α/β和alpha2 /β形式的人类葡糖苷酶II与杆状病毒表达系统表达的蛋白质。人类α或β亚基的表达仅导致积极的人类/昆虫异型酶的形成,展示功能互补的内生昆虫葡糖苷酶II的子单元。人类的活动形式的重组葡糖苷酶二世是检查对硝基苯alpha-D-glucopyranoside衬底,和两个结合位点动力学模型底物了。K (M1-2)值和明显的K (i1-2) deoxynojirimycin castanospermine测定和发现相同亚型暗示他们有相似的催化和抑制特性。 The substrate specificities of both isoforms using the physiological oligosaccharides were assessed and found to be similar.