抗体针对细胞色素P450IIB1和P450IIB2的高变区和常数区。
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Oesch F, Waxman DJ, Morrissey JJ, Honscha W, Kissel W, Friedberg T
抗体针对细胞色素P450IIB1和P450IIB2的高变区和常数区。
生物化学学报。1989年4月;270(1):23-32。
- PubMed ID
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2539047 (PubMed视图］
- 摘要
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在大肠杆菌中表达β -半乳糖苷酶与细胞色素P450IIB1或细胞色素P450IIB2的6个不同片段(长度从18到33个氨基酸不等)构建的融合蛋白。首先通过β -半乳糖苷酶柱吸附针对这些融合蛋白的兔抗体，然后在含有相应融合蛋白的第二柱上进行免疫纯化。除了针对细胞色素P450IIB1的疏水氨基末端片段的抗体外，所有的抗肽抗体都识别了肝微粒体蛋白免疫印迹上的主要苯巴比妥诱导的细胞色素P450IIB1和-IIB2。其中两种抗体是针对细胞色素P450IIB1和-IIB2初级结构不同的区域产生的，并且对这两种高度同源的细胞色素具有不同的反应。一些抗肽抗体也与一些个体sprige - dawley大鼠肝脏中表达的第三种苯巴比妥诱导的微粒体蛋白反应，该蛋白与P450IIB1的相关性高于P450IIB2。这个P450IIB1相关的P450，命名为P450IIB1*，被纯化到明显的同质性，并显示出羟基化类固醇激素睾酮和雄烯二酮，具有明确的区域特异性和P450IIB1的高催化活性特征。使用抗肽抗体检测到的第四个微粒体蛋白似乎与P450IIB2高度相关。由于这些抗肽抗体识别的P450分子上的片段是已知的，因此有可能预测P450IIB1*和P450IIB2相关蛋白分别与细胞色素P450IIB2和-IIB1的不同之处。这些研究证明了位点特异性抗P450抗体用于研究细胞色素P450基因超家族中结构相关的P450s和多态变体的表达。