肝苯巴比妥诱导细胞色素P-450磷酸化。
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裴志林，谷口勇
肝苯巴比妥诱导细胞色素P-450磷酸化。
EMBO J. 1989 10月;8(10):3003-10。
- PubMed ID
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2583091 (PubMed视图］
- 摘要
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从大鼠肝脏中纯化的主要苯巴比妥诱导细胞色素P-450，细胞色素P-450基因超家族II家族的成员，可被camp依赖性蛋白激酶快速磷酸化。磷酸化在5分钟后达到大于0.5 mol磷酸盐/mol P-450，并伴随着酶活性的下降。128位的丝氨酸残基被证明是唯一的磷酸化位点，被还原的细胞色素的一氧化碳差谱从450 nm转移到420 nm表明蛋白质的构象变化。比较不同细胞色素P-450家族的氨基酸序列，发现在磷酸化丝氨酸残基附近有一个高度保守的精氨酸残基，它构成了激酶识别序列。它还揭示了只有细胞色素P-450家族II的成员携带这种激酶识别序列。为了发现这种磷酸化是否也发生在体内，用32Pi标记来自苯巴比妥预处理大鼠的完整肝细胞的可交换磷酸池，然后用渗透膜的二丁基- camp或腺苷酸环化酶刺激剂胰高血糖素孵育细胞以激活内源性激酶。结果，与细胞色素P-450具有相同电泳迁移率的微粒体多肽被强烈标记。肽定位和单特异性抗体免疫沉淀鉴定该蛋白为主要的苯巴比妥诱导细胞色素P-450。它在无细胞磷酸化的丝氨酸残基上被磷酸化。(摘要删节至250字)