转铁蛋白受体突变分析显示重叠的HFE和转铁蛋白结合位点。
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West AP Jr, Giannetti AM, Herr AB, Bennett MJ, Nangiana JS, Pierce Jr, Weiner LP, Snow PM, Bjorkman PJ
转铁蛋白受体突变分析显示重叠的HFE和转铁蛋白结合位点。
分子生物学杂志，2001 10月19日;313(2):385-97。
- PubMed ID
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11800564 (PubMed视图］
- 摘要
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转铁蛋白受体(TfR)结合两种对铁代谢至关重要的蛋白质:转铁蛋白(Tf)和HFE，这种蛋白质在遗传性血色素沉着症中发生突变。先前的研究结果表明，Tf和HFE在与TfR的结合过程中存在竞争关系，表明Tf和HFE结合在TfR的相同或重叠位点上。TfR是一种同型二聚体，每个多肽链结合一个Tf (2:2, TfR/Tf化学计量)，而已经观察到2:1和2:2 TfR/HFE化学计量。为了更全面地描述HFE和TfR之间的相互作用，我们使用平衡凝胶过滤和分析超离心确定了结合化学计量。这两种技术都表明，在亚微摩尔浓度的溶液中可以形成2:2的TfR/HFE复合物，这与HFE通过阻断Tf结合位点而不是发挥变构效应来竞争Tf与TfR结合的假设一致。为了确定TfR上的Tf和HFE结合位点是否重叠，从2.8 A分辨率的HFE-TfR共晶结构中识别出TfR上HFE结合位点的残基，然后突变并测试其对HFE和Tf结合的影响。可溶性TfR突变体对HFE和Tf的结合亲和力是用表面等离子体共振法测定的。HFE结合位点上5个TfR残基(L619A、R629A、Y643A、G647A和F650Q)的取代导致Tf结合亲和力显著降低。HFE和Tf均与TfR形成2:2配合物，HFE结合位点的突变影响Tf结合，这一发现支持了HFE和Tf争夺TfR重叠结合位点的模型。