隔离、cDNA克隆,和过度的33-kD细胞表面糖蛋白结合到球状C1q的“头”。
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Ghebrehiwet B, Lim提单,Peerschke EI,威利斯AC,里德KB
隔离、cDNA克隆,和过度的33-kD细胞表面糖蛋白结合到球状C1q的“头”。
J Exp。1994年6月1日,179(6):1809 - 21所示。
- PubMed ID
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8195709 (在PubMed]
- 文摘
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本工作描述的功能特征,cDNA克隆,细胞表面蛋白和表达的小说。Raji这种蛋白质指定gC1q-R,首次分离出细胞,发现球状C1q的“正面”结合的分子,在生理离子强度,并抑制complement-mediated人类血清的绵羊红细胞溶解。NH2-terminal氨基酸序列的第一个24残留C1q-binding蛋白质的决心和这个信息允许两个简并的合成聚合酶链反应引物用于制备探针的B细胞cDNA文库的筛选。互补脱氧核糖核酸分离,使用这种探头,发现编码pre-pro 282残留的蛋白质。Raji分离蛋白的氨基末端细胞残留在74年开始的预测pre-pro序列。互补脱氧核糖核酸序列表明,纯化蛋白有三个潜在N-glycosylation残留物和高度紧张,酸性分子。因此,其绑定C1q可能主要但不限于由于离子的相互作用。相对应的“成熟”蛋白质,氨基酸残基74 - 282年的预测pre-pro序列,在大肠杆菌中,纯化同质性。这个重组蛋白也能抑制complement-mediated羊红细胞的溶解人类血清和被证实是一个四聚物的凝胶过滤nondissociating条件。北部污点和rt - pcr研究表明,C1q-binding蛋白表达在高水平Raji Daudi细胞系,在U937适度,Molt-4, HepG2细胞系和HL60细胞株在很低的水平。 However, it is not expressed in the K562 cell line. Comparison of gC1q-R NH2-terminal sequence with that of the receptor for the collagen-like domain of C1q (cC1q-R) showed no similarity. Furthermore, antibodies to gC1q-R or an 18-amino acid residue-long NH2-terminal synthetic gC1q-R peptide did not cross-react with antibodies to cC1q-R. Anti-gC1q-R immunoblotted a 33-kD Raji cell membrane protein, whereas anti cC1q-R recognized a molecule of approximately 60 kD. The NH2-terminal sequence of gC1g-R appears to be displayed extracellularly since anti-gC1g-R peptide reacted with surface molecules on lymphocytes, polymorphonuclear leukocytes, and platelets, as assessed by flow cytometric and confocal laser scanning microscopic analyses.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)