酪氨酸硫酸盐化作用在人类ca5的n端结构域受体是必要的绑定的趋化作用抑制金黄色葡萄球菌的蛋白。
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刘ZJ、杨YJ江L,徐YC王AX, Du GH,高JM
酪氨酸硫酸盐化作用在人类ca5的n端结构域受体是必要的绑定的趋化作用抑制金黄色葡萄球菌的蛋白。
学报杂志。2011年8月,32 (8):1038 - 44。doi: 10.1038 / aps.2011.53。Epub 2011年6月27日。
- PubMed ID
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21706042 (在PubMed]
- 文摘
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目的:金黄色葡萄球菌躲避宿主防御通过释放一些毒性蛋白,如趋化作用抑制金黄色葡萄球菌的蛋白(芯片)。已经表明,细胞外的N末端C5a受体(C5aR)形式绑定域名芯片,和酪氨酸硫酸盐化作用正成为一个关键因素在确定蛋白质的相互作用。本研究的目的是评估的角色酪氨酸硫酸盐化作用的氨基端和芯片的C5aR绑定。方法:表达质粒编码C5aR及其突变体准备使用PCR和基因定点诱变和被用来使转染HEK 293 t细胞使用磷酸钙。蛋白质纯化重组芯片。西方墨点法用于检查绑定芯片C5aR及其突变体的效率。结果:芯片C5aR完全结合,但不是C5L2或C3aR。一种特异性的硫酸盐化作用抑制剂,氯酸钠(50 nmol / L),减少绑定C5aR与芯片的能力。阻断突变硫酸盐化作用的酪氨酸,苯丙氨酸在C5aR N末端位置11和14,阻止了硫酸盐化作用,完全废除芯片绑定。苯丙氨酸酪氨酸14单独突变时,重组芯片绑定效率被大大降低了。 CONCLUSION: The results demonstrate a structural basis of C5aR-CHIPS association, in which tyrosine sulfation of N-terminal C5aR plays an important role. Our data may have potential significance in development of novel drugs for therapeutic intervention.