机械的研究自体活动PAK2:独联体起始的两步模型反式放大紧随其后。
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王J,吴JW,王ZX
机械的研究自体活动PAK2:独联体起始的两步模型反式放大紧随其后。
生物化学杂志。2011年1月28日,286 (4):2689 - 95。doi: 10.1074 / jbc.M110.156505。Epub 2010年11月22日。
- PubMed ID
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21098037 (在PubMed]
- 文摘
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通过自身磷酸化蛋白激酶激活,激活的循环,是一种常见的监管机制phosphorylation-dependent信号级联。尽管这个反应的发生率,其重要性在生物调节,自身磷酸化的分子机制了解甚少。在这项研究中,我们开发了一个动力学定量的方法来区分cis -和trans-pathways自催化反应。使用这种方法,我们进行了详细的动力学分析为自体活动短暂快速脉冲刺激导致蛋白蛋白激酶2 (PAK2) 21的机制。PAK2监管由小型GTP-binding蛋白质,体内和体外Cdc42和Rac。全面激活PAK2需要守恒的苏氨酸的自身磷酸化,刺(402),在激活循环催化激酶结构域。分析底物反应的时间课程期间PAK2自体活动表明自身磷酸化的刺(402)在PAK2遵循一个两步的cis启动机制,其次是反式放大。磷酸化PAK2经历一个分子内(cis)自身磷酸化刺(402)生产磷酸化PAK2,这个新成立的活跃PAK2然后在用力推磷酸化其他PAK2分子(402)以分子间(反式)的方式。基于动力学方程推导,所有微观动力学常数的顺式和反式自身磷酸化定量估计。新方法的优势不仅是它的实用性研究快速激活反应,但其研究的方便衬底对改性反应的影响。 It would be particularly useful when the regulatory mechanism of the autophosphorylation reaction toward certain enzymes is being assessed.