转染人MDR1基因的MDCK细胞是人肠粘膜的良好模型吗?

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唐飞，堀江贵文，波夏特RT

转染人MDR1基因的MDCK细胞是人肠粘膜的良好模型吗?

Pharm Res. 2002 Jun;19(6):765-72。

PubMed ID

12134945 (PubMed视图

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摘要

目的:研究转染人MDR1基因(MDCK-MDR1)的Madin-Darby犬肾细胞是否为良好的人肠黏膜模型。方法:采用Western blotting方法比较Caco-2细胞中p -糖蛋白(P-gp)的表达与MDCK野生型(MDCK- wt)和MDCK- mdr1细胞中P-gp的表达。以地高辛为底物，比较了MDCK-MDRI细胞、MDCK-WT细胞和Caco-2细胞中P-gp(s)的极化外排活性。测定了三种细胞系长春碱外排的表观Michaelis-Menten常数(K(M)，Vmax)。已知底物/ P-gp抑制剂的表观抑制常数(K(I))通过测量它们对地高辛在Caco-2或MDCK-MDR1细胞单层中的外排的影响来确定。结果:通过Western blots估计，与Caco-2和MDCK-WT细胞相比，MDCK-MDR1细胞表达了更高水平的P-gp。在分子量分别为150 kDa和170 kDa的Caco-2和MDCK细胞中表达P-gp的两种亚型。在MDCK-MDR1细胞中，150 kDa亚型似乎过表达。MDCK-MDR1细胞比Caco-2和MDCK-WT细胞表现出更高的[3H]-地高辛极化外排。Caco-2中长春碱的K(M)值。 MDCK-WT, and MDCK-MDR1 cells were 89.2+/-26.1, 24.5+/-1.1, and 252.8+/-134.7 microM, respectively, whereas Vmax values were 1.77+/-0.22, 0.42+/-0.01, and 2.43+/-0.86 pmolcm(-2)s(-1), respectively. Known P-gp substrates/inhibitors showed, in general, lower K(I) values for inhibition of digoxin efflux in Caco-2 cells than in MDCK-MDR1 cells. CONCLUSIONS: These data suggest that the MDCK-MDR1 cells overexpress the 150 kDa isoform of P-gp. MDCK-MDR1 cells are a useful model for screening the P-gp substrate activity of drugs and drug candidates. However, the apparent kinetics constants and affinities of substrates determined in the MDCK-MDR1 cell model may be different than the values obtained in Caco-2 cells. These differences in substrate activity could result from differences in the relative expression levels of total P-gp in Caco-2 and MDCK-MDR1 cells and/or differences in the partitioning of substrates into these two cell membrane bilayers.

引用本文的药物库数据

药物转运蛋白

药物	转运体	种类	生物	药理作用	行动
道诺霉素	22 - 1	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂 诱导物	细节
依托泊苷	22 - 1	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂	细节
奎尼丁	22 - 1	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂	细节
利血平	22 - 1	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂 诱导物	细节
长春花碱	22 - 1	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂 诱导物	细节
长春新碱	22 - 1	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂 诱导物	细节

绑定属性

药物	目标	财产	测量	pH值	温度(°C)
环孢霉素	22 - 1	Ki (nM)	2180	N/A	N/A	细节
道诺霉素	22 - 1	Ki (nM)	111000	N/A	N/A	细节
依托泊苷	22 - 1	Ki (nM)	768000	N/A	N/A	细节
利血平	22 - 1	Ki (nM)	11500	N/A	N/A	细节
维拉帕米	22 - 1	Ki (nM)	15100	N/A	N/A	细节
长春花碱	22 - 1	Ki (nM)	140000	N/A	N/A	细节
长春新碱	22 - 1	Ki (nM)	213000	N/A	N/A	细节