突变分析alpha-subunit蛋白质治疗。催化作用的证据。
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安德烈斯·戈尔茨坦杰,何鸿燊YK,布朗女士
突变分析alpha-subunit蛋白质治疗。催化作用的证据。
J生物化学杂志。1993年1月15日,268 (2):1383 - 90。
- PubMed ID
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8419339 (在PubMed]
- 文摘
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蛋白质治疗老鼠大脑由紧密相关的α-和beta-subunits迁移的377年和437年氨基酸SDS-polyacrylamide凝胶表面的分子质量49和46 kDa,分别。p21ras高度通过组织半胱氨酸酶和其他蛋白质含有半胱氨酸残基羧基末端在第四的位置。稳定的酶在动物细胞生产需要的同步合成单元,和所有活动失去当单元分离化学。锌的beta-subunit功能(2 +)端依赖蛋白质基质的绑定。alpha-subunit的角色是未知的。在当前的研究中我们使用体外诱变和转染克隆的互补的定义是必要的部分alpha-subunit稳定beta-subunit并支持通过转移。删除51个氨基酸的氨基末端alpha-subunit允许的正常稳定beta-subunit和生产正常酶活性,但删除106个氨基酸废除这两个属性。脯氨酸区域在alpha-subunit残留开车不需要活动,但它的存在解释了异常缓慢的迁移SDS-polyacrylamide多肽的凝胶。删除只有5个氨基酸的羧基末端alpha-subunit活动明显减少。替换的天冬酰胺守恒的赖氨酸在164位置产生一个稳定的alpha-subunit beta-subunit通常和允许的正常绑定两个基板,通过焦磷酸和p21H-ras。 Nevertheless, the rate of transfer of the bound farnesyl group to p21H-ras was markedly reduced. The latter finding suggests that the alpha-subunit plays a direct role in the catalytic reaction in addition to its role in the stabilization of the beta-subunit.