钙结合序列与presenilin-2 calmyrin调节互动。
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朱J,稳定SM,艾姆斯JB Baskakov我,蒙泰罗乔丹
钙结合序列与presenilin-2 calmyrin调节互动。
细胞实验研究》2004年11月1日,300 (2):440 - 54。
- PubMed ID
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15475008 (在PubMed]
- 文摘
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Calmyrin myristoylated钙结合蛋白,包含四个假定的类ef - hand。Calmyrin与大量的蛋白质,包括presenilin-2 (PS2)。然而,calmyrin的生物物理性质,分子机制,规范其绑定到不同的合作伙伴,都不清楚。通过定点诱变和Ca2 +绑定的研究,我们发现calmyrin绑定两个Ca2 +离子的离解常数约53 microM,和两个c端类ef - hand 3和4结合钙。利用紫外光谱、圆二色性(CD)和核磁共振,我们发现无Ca(2 +)和绑定calmyrin大大不同的蛋白质构象。通过酵母2台混合动力分析,我们发现,这两类ef - hand 3和4的calmyrin必须完整calmyrin与PS2-loop序列。脉冲追踪研究的海拉细胞转染calmyrin表达式构造表明,野生型(Wt) calmyrin半衰期约为75分钟,而突变的缺陷myristoylation周转更快(半衰期35分钟)。相比之下,半衰期calmyrin突变体的破坏类ef - hand 3或4类ef - hand 52和170分钟,分别。使用免疫荧光染色的海拉细胞转染和Wt突变calmyrin互补,我们发现钙绑定和myristoylation calmyrin的重要动态细胞内定位。双重免疫荧光显微镜表明Wt和myristoylation-defective calmyrin蛋白质colocalize有效并与PS2在相同的程度上,而calmyrin突变体缺陷在钙绑定显示与PS2 colocalization少。 Our results suggest that calmyrin functions as a calcium sensor and that calcium binding sequences in calmyrin are important for interaction with the PS2 loop.