受体活化C激酶1 (RACK1)通过物理相互作用抑制瞬时受体电位(TRP)型通道Pkd2L1的功能。
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杨健，王强，郑伟，图利杰，李强，吴勇，侯赛因S，戴晓强，沙飞S，李小刚，沈佩萍，涂建军，陈小忠
受体活化C激酶1 (RACK1)通过物理相互作用抑制瞬时受体电位(TRP)型通道Pkd2L1的功能。
生物化学杂志，2012年2月24日;287(9):651 -61。doi: 10.1074 / jbc.M111.305854。Epub 2011 12月15日。
- PubMed ID
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22174419 (PubMed视图］
- 摘要
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Pkd2L1(也称为TRPP3)是一个非选择性阳离子通道，可渗透Ca(2+)、Na(+)和K(+)，并可被Ca(2+)激活。它也是酸触发的无反应阳离子通道复合体的一部分。我们之前报道了Pkd2L1 c端片段在其通道功能中的作用，但N端所起的作用尚不清楚。使用酵母双杂交筛选，我们发现Pkd2L1 N端与活化C激酶1 (RACK1)受体相互作用，RACK1是一种涉及各种细胞功能的支架/锚定蛋白。这种相互作用需要RACK1的最后两个Trp-Asp (WD) motif和Pkd2L1的Ala(19)-Pro(45)片段。通过GST下拉、印迹叠加和免疫共沉淀实验证实了相互作用。通过Ca示踪剂摄取和双微电极电压钳电生理，我们发现在RACK1过表达的爪蟾卵母细胞中，Pkd2L1通道活性被取消或大幅降低。结合卵母细胞表面生物素化实验，我们发现RACK1抑制了Pkd2L1通道在质膜上的功能，同时降低了Pkd2L1通道的总表达和质膜表达。过表达Pkd2L1 N-或c端片段作为Pkd2L1-RACK1相互作用的潜在阻断肽，我们发现Pkd2L1 N端片段Met(1)- pro(45)，而不是Ile(40)-Ile(97)或c端片段，可能通过破坏Pkd2L1-RACK1的关联，通过过表达和卵细胞原生RACK1来消除Pkd2L1通道的抑制。综上所述，我们的研究表明RACK1通过结合Pkd2L1的Met(1)-Pro(45)结构域抑制Pkd2L1通道功能。 Thus, Pkd2L1 is a novel target channel whose function is regulated by the versatile scaffolding protein RACK1.