识别和量化体内甲基化被沉重的甲基SILAC网站。
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昂,Mittler G,曼M
识别和量化体内甲基化被沉重的甲基SILAC网站。
Nat方法。2004年11月,1(2):119 - 26所示。Epub 2004年10月21日。
- PubMed ID
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15782174 (在PubMed]
- 文摘
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蛋白甲基化是一种稳定的翻译修饰(天车)和重要的生物功能。它主要发生在与不同数量的甲基精氨酸和赖氨酸残留物,如mono - di -或三甲基赖氨酸。现有的方法确定甲基化的网站是非常艰苦的,需要大量的样本不能用于复杂的混合物。我们曾描述了稳定同位素标记的氨基酸在细胞培养(SILAC)定量蛋白质组的比较。在沉重的甲基SILAC,细胞新陈代谢转化[(13)CD(3)]蛋氨酸的唯一生物甲基供体,[(13)CD (3)] S-adenosyl蛋氨酸。沉重的甲基被完全纳入体内甲基化网站,直接标记天车。这提供了识别显著增加信心和相对定量蛋白质甲基化质谱。使用抗体针对甲基化残留液体chromatography-tandem质谱的分析,我们确定了59个甲基化网站,包括未知的网站,大大延长体内甲基化网站的数量描述的文学。